Τι είναι η ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη

Η ανασυνδυαστική πρωτεΐνη είναι μια πρωτεΐνη που κωδικοποιείται από το χειρισμένο γονίδιο - το ανασυνδυαστικό γονίδιο και παράγεται από το ειδικό σύστημα ανασυνδυαστικής έκφρασης (βλ. συστήματα έκφρασης πρωτεϊνών).Το ανασυνδυασμένο γονίδιο είναι ένας νέος γενετικός συνδυασμός που ένα ή περισσότερα τμήματα DNA ή γονίδια έχουν εισαχθεί από ένα διαφορετικό μόριο ή από από άλλα είδηΣε σύγκριση με τις φυσικές πρωτεΐνες, οι ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες μπορούν να παραχθούν σε μεγάλες ποσότητες με σχετική ευκολία.

Η ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στη μελέτη βιολογικών διεργασιών όπως οι κυτοκίνες και οι παράγοντες ανάπτυξης, οι ερευνές για τα ένζυμα και τις κινάσες και οι λειτουργίες του συστήματος συμπληρωμάτων.οι ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες είναι γνωστά ως πολύ ισχυρά φάρμακα που είναι ασφαλή από ανεπιθύμητες ενέργειες εκτός στόχου, χρειάζονται μικρότερο χρόνο για να αναπτυχθούν από τα μικρά μόρια (βλέπε ανασυνδυασμένα φάρμακα πρωτεΐνης).

Πώς γίνεται η ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη

Για να δημιουργηθούν ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες, το γονίδιο απομονώνεται και κλωνοποιείται σε έναν φορέα έκφρασης.Σύστημα καθαρισμού πρωτεϊνών και συστήματα αναγνώρισης πρωτεϊνών.

Βασικά βήματα για να αποκτήσετε ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη:
1- Αύξηση του γονιδίου ενδιαφέροντος.
2- Εισάγετε το κλωνοποιητικό φορέα.
3Υπο-κλωνοποίηση σε φορέα έκφρασης.
4. Μετατροπή σε ξενιστή που εκφράζει πρωτεΐνες (βακτηρίδια (E coli), μύκητες, κύτταρα θηλαστικών ή σύστημα κυττάρων βακουλοϊού-πολυοειδών).
5Δοκιμή για την ταυτοποίηση της ανασυνδυασμένης πρωτεΐνης.
6Μεγάλη παραγωγή.
7Απομόνωση και καθαρισμός.

Απομόνωση πρωτεϊνών

Επειδή οι χημικές και φυσικές ιδιότητες των πρωτεϊνών ποικίλλουν, μπορούν να απομονωθούν η μία από την άλλη για μεταγενέστερη ανάλυση με διάφορες συνήθως χρησιμοποιούμενες μεθόδους:

Κεντρίφωση Η μάζα και το σχήμα μιας πρωτεΐνης της δίνουν ένα ειδικό ρυθμό ιζηματοποίησης υπό υψηλές δυνάμεις g, επιτρέποντας τον διαχωρισμό
Ηλεκτροφορέση με τζελ ∙ Πολυπεπτιδικές αλυσίδες διαφορετικού μοριακού βάρους μεταναστεύουν μέσα από μια μήτρα τζελ (όπως το πολυακρυλαμίδιο) με διαφορετικούς ρυθμούς όταν εφαρμόζεται ηλεκτρικό πεδίο
Η υγρή χρωματογραφία διαχωρίζει τις πρωτεΐνες με βάση την κίνησή τους μέσα από μια στήλη που περιέχει σφαιρικές χάντρες.φορτίο (στήλη ανταλλαγής ιόντων) και συμπεριφορά δέσμευσης με λιγκάντες (στήλη συγγένειας)